| 資訊﹕NASBA技術簡介 |
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| NASBA（依賴於核酸序列的擴增技術）是一項連續、等溫、基於酶反應的核酸擴增技術。該技術使用三種酶（禽類成肌細胞增多症病毒反轉錄酶、核糖核酸酶H、噬菌體T7核糖核酶酸聚合酶）和兩種特別設計的寡核酸引物。上游引物5'末端包含有噬菌體T7的依賴於DNA的RNA聚合的酶動子序列，下游引物的5'末端包含有和釕標電化學發光檢測探針（ECL Probe）互補的序列。在擴增步驟中，兩個5'端都整合進擴增序列中，從而高效率生產出互補RNA序列的模板（直接由RNA聚合酶產生，如圖）。該技術特別適用于擴增單鏈RNA，並在最適宜的條件下，擴增倍數可達1012之多。 |
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| 擴增之後，採用電化學發光反應（ECL）或為聯抗體捕獲法（MP）都可進行診斷。在ECL檢測系統中，通過一個用來確定RNA擴增子存在的額外的捕獲探針 ，檢測系統的特異性得到加強，擴增反應完成後，一部分產物加入含有捕獲探針和ECL探針的雜交溶液中（見圖）。捕獲探針特異性對應於目的RNA擴增子，同時ECL探針是屬別特異並且互補於RNA擴增子。在溫育過後，已雜交的擴增子和ECL探針形成複合物，攜帶該複合物的磁珠被電極的表面磁性捕獲。電極上的電壓引起電化學發光（ECL）反應。已雜交上的釕標磁珠發出的光和擴增反應產生的RNA擴增子總量成比例對應。 |
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| 酶聯抗體捕獲反應（MP）檢測系統中，擴增反應通過一個連接了鏈酶胍包被的微孔板的寡核酶酸捕獲探針被固定（見圖）。地穀新配基標記的寡核酶酸檢測探針被加入並連接到固定的擴增子上，酶聯抗地穀新配基抗體被加入並通過一個標準96孔微孔板分光光度計在405nm檢測所產生的比色信號。 |
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