| 资讯：NASBA技术简介 |
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| NASBA（依赖于核酸序列的扩增技术）是一项连续、等温、基于反应的核酸扩增技术。该技术使用三种（禽类成肌细胞增多症病毒反转录、核糖核酸H、噬菌体T7核糖核酸聚合酶）和两种特别设计的寡核酸引物。上游引物5'末端包含有噬菌体T7的依赖于DNA的RNA聚合的动子序列，下游引物的5'末端包含有和钌标电化学发光检测探针（ECL Probe）互补的序列。在扩增步骤中，两个5'端都整合进扩增序列中，从而高效率生产出互补RNA序列的模板（直接由RNA聚合酶产生，如图）。该技术特别适用于扩增单链RNA，并在最适宜的条件下，扩增倍数可达1012之多。 |
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| 扩增之后，采用电化学发光反应（ECL）或为联抗体捕获法（MP）都可进行诊断。在ECL检测系统中，通过一个用来确定RNA扩增子存在的额外的捕获探针 ，检测系统的特异性得到加强，扩增反应完成后，一部分产物加入含有捕获探针和ECL探针的杂交溶液中（见图）。捕获探针特异性对应于目的RNA扩增子，同时ECL探针是属别特异并且互补于RNA扩增子。在温育过后，已杂交的扩增子和ECL探针形成复合物，携带该复合物的磁珠被电极的表面磁性捕获。电极上的电压引起电化学发光（ECL）反应。已杂交上的钌标磁珠发出的光和扩增反应产生的RNA扩增子总量成比例对应。 |
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| 酶联抗体捕获反应（MP）检测系统中，扩增反应通过一个连接了链酶胍包被的微孔板的寡核酶酸捕获探针被固定（见图）。地谷新配基标记的寡核酶酸检测探针被加入并连接到固定的扩增子上，酶联抗地谷新配基抗体被加入并通过一个标准96孔微孔板分光光度计在405nm检测所产生的比色信号。 |
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